Meme Kanseri hastalarında PCR RFLP Yöntemiyle AR Genindeki Pro12Ala Polimorfizminin İncelenmesi

Abstract

Giriş: Meme kanseri klinik olarak heterojen biı hastalıktır, geniş bir morfolojik çeşitliliği ve kendine özgü gen ekspresyon profilleri vardır. Protein fonksiyonu veya ekspresyonunun olası elkileri nedeniyle, tümörün klinik fenotipinin etkileri kadar meme kanserinin gelişiminde bireysel eğiliınlerde olabilen karsinojen metabolizmasında, östrojen üretimi, DNAtamiri ve hücre döngüsü kontrolündeki genlerde mantıksal olariak polimorfızmlerden şüphelenilir. Olası bir polimorfizm, PPARG geninin İipid meıabolizması üzerindekı etkisi ile ilişkili olabileceği düşünülen Pro12Ala gen polimorfizmidir.Yapılan çalışmalarda PCR-RFLP vöntemi ile meme kanserli hastalarda Pro12Ala poliimorfizminin inçelenmesi ve bu polimorfizm ile meme kanseri riski arasındaki ilişkinin belirlenmesi amaçlanrnıştır. Gereçler ve Yöntemler: Bağcılar Araştırma ve Uyglılama Hastanesi patoloji Anabiliın Dalı'ndan edinilen paraifinee gömülü doku örneklerİnde (13 tümörlü,2 tümörsüz doku) deparafinizasyon işleminden sonra manuel slarak DNA izolasyonu gerçekleştiirilmıiştir. PPARG geninin primerleriyle PCR amplifıkasyonu yapılmıştır. PCR ürünleri Pro12Ala polimorfizmine özgü kesim yapan BstUl eıızimi ile kesilmiş ve daha sonra agaroz jel elektroforezi ile görüntülenerek incelenmiştir. Bulguİar: Pro12Ala polimorfizminde. PPARG geninin B ekzonu 12. kodonunda CCA dizisinin GCA'ya dönüşümü (C'nin G'ye dönüşümü) meydana gelmektedir. BstUI enzimi polimorfizm olduğu durumda 5'... CG-CG, 3' bölgesinden kesmektedir. , Bireyin iki allelinde de polimorfızm olması durumunda jel eiektroforezi sonrasında 227 ve 43 bp'lik iki bant gözlenir ve bu durum homozigot polimorfizm olarak adlandırıİır, Bireyin tek alelinde polimorfızm varsa; kesilmeyen allel için 270 bp'lik, kesilen allel için 227 ve 43 bp'lik oimak üzere üç bant gözlenir ve bu durum heterozigot polimorfizm olarak adlandırılır.Bireyde polimorfizm yoksa keşim olmaz ve sadeçe 270 bp'lik bir bant gÖzlenir. Kesim sonuç- larına göre l3 tümörlü dokudan 8inde heterozigot Pro12Ala polimorfizmi saptanmış ve 2 normal dokuda polimorfizm olmadığı görülmüştür. Sonuç ve Tartışma: Yapılan literatür taramasıı sonuçunda çelişkili bilgilerin mevcut olduğu ve bunun yanı sıra çoğu makalede Pro12Ala polirrıorfizmiyle merne kanseri arasında anlamlı bir ilişki saptanamadığı görülmüştür, Kısmen ortak olan blr görüşte ise polimorfızm taşıyan bireylerde meme kanseri veya diğer kanserlere yakalanma riskinin daha yüksek olduğu tahmin edilmektedir. l3 meme kanserli dokunun 8'inde bu polimorfizmin bulunması ve 2 kanserli olmayan dokuda bulunmaması, bu poİimorfızmin meme kanseri ile ilişkili olabileceğini düşündürmektedir.