SKBR3 Hücre Hattında Gallik Asit Ve Tekamenin Kombine Terapisi İle Apoptotik DNA Fragmentasyonunun Uyarılması

Abstract

Bazı bitkilerde ve gıdalarda oldukça yoğun bulunan antosiyanin zengini bir beslenme, bazı kanser türlerinin inhibisyonunun sağlanmasında etkilidir. Tekamen(Irinotecan-Hcl) özellikle kolorektal kanserin tedavisinde kullanılan bir antineoplastik enzim inhibitörüdür. Topoizomeraz I'in aksiyonunu inhibe eden camptotthecin yarı sentetik çeşididir. DNA-topoizomeraz kompleksine bağlanarak DNA çift ipliğinde kırıklara sebep olarak hücre ölümüne sebep olur. Antosiyanin metaboliti galice asit ve antineoplastik enzim inhibitörü Tekamen (Irinotecan-Hcl)' nini kombine uygulamasının apoptotik DNA fragmentasyonu üzerindeki etkisinin incelenmesi hedeflenmiştir. SKBR3 hücreleri DMEM besiyerinde %5CO2 ve 37C içeren inkübatörlerde büyütülmüştür. Hücre canlılıkları MTT testi ile belirlenmiştir. Hücrelere belirlenen konsantrasyonlarda ilaç 48saat boyunca uygulanmıştır. İlaç uygulanan hücrelerden DNA fragmentasyon protokolüne göre DNA izole edilmiş ve DNA fragmentleri %2lik agaroz jelde görüntülenmiştir. Gallik asit, tekamen ve IC50 değerlerinin1/4 oranları alınarak uygulanan kombine terapi için belirlenen IC50 değerleri sırasıyla 250 uM, 75uM ve 62.5/18.75 uM; hücre canlılıkları sırasıyla %48.29,%49.96 ve %50.103 olarak bulunmuştur. apoptoz uyarılmasının belirteci olan DNA fragmentasyonunun 48 saatlik kombine ilaç uygulaması ile arttığı belirlenmiştir. Bu sonuçlar ilaçların kombine uygulanması ile hücre ölümü apoptozun uyarıldığını göstermektedir. Bu çalışma gallik asit ve tekamenin kombine uygulaması ile apoptotik yolağın incelenmesi için öncü bir çalışma olabilir.