İmatinib Dirençli k562r Hücre Hattında Kematerapötik Ajanların Oluşturduğu Reaktif Oksijen Türlerinin Sığla Yağı ile Ortadan Kaldırılması

Abstract

Liquidambar orientalis Mill (Hamamelidaceae)'den elde edilen Sweetgum Oil (SO) Türk halk hekimliğinde antiülserojenik olarak yüzyıllar boyunca kullanılmıştır. Antibakteriyel ve antioksidan aktivitesi çeşitli çalışmalarda gösterilmiştir. Bu çalışmada K562R ve K562S hücre hatlarında sitotoksik dozda Tirozin Kinaz İnhibitörleri (TKİ) ile Sweetgum Oil kombinasyonunun reaktif oksijen türlerinin oluşumu ve bunun otofaji üzerine etkilerini incelemek amaçlanmıştır. Bu amaç doğrultusunda K562R ve K562S hücre hatlarında sitotoksisite, ROS oluşumu, DNA hasarı, otofaji, otofaji ile ilişkili proteinlerden otofagozom oluşumunda rol oynayan LC3α/β proteini, vezikül uzamasında görevli Atg5 proteini ve ROS oluşumuna bağlı olarak inaktif hale gelen Atg4A proteininin ekspresyon seviyelerine etkileri incelenmiştir. Bu çalışmanın sonucunda sığla yağı kullanımında oluşan ROS’un K562R hücrelerinde ponatinibe kıyasla %28,8 oranında, K562S hücrelerinde ise imatinibe göre %23,8 oranında daha az olduğu görülmüştür. Sığla yağı ile tedavi edilen hücrelerde tirozin kinaz inhibitörleri ile tedavi edilen hücrelere daha az DNA hasarı meydana gelmiştir. Sığla yağının otofajiyi artırdığı LC3α/β ve Atg5 proteinlerinin ekspresyonlarından anlaşılmaktadır. Ayrıca ROS’un fazla olduğu gruplarda Atg4A ekspresyonunun azaldığı görülmüştür.

Sweetgum Oil (SO) obtained from Liquidambar orientalis Mill (Hamamelidaceae) has been used in Turkish folk medicine as an antiulcerogenic for centuries. Its antibacterial and antioxidant activity has been shown in several studies. In this study, it was aimed to investigate the cytotoxic dose of Tyrosine Kinase Inhibitors (TKI) and Sweetgum Oil combination on the formation of reactive oxygen species and their effects on autophagy in K562R and K562S cell lines. For this purpose, in K562R and K562S cell lines, cytotoxicity, ROS formation, DNA damage, autophagy, LC3α/β protein, which plays a role in autophagy-related proteins autophagosome formation, Atg5 protein involved in vesicle elongation, and the effects of Atg4A protein, which becomes inactive due to ROS formation, were investigated. As a result of this work, it was observed that the ROS produced by using sweetgum oil was 28.8% less in K562R cells compared to ponatinib and 23.8% less in K562S cells than imatinib. Less DNA damage occurred to cells treated with tyrosine kinase inhibitors in cells treated with sweetgum oil. It is understood from the expressions of LC3α/β and Atg5 proteins that sweetgum oil increases autophagy. In addition, it was observed that Atg4A expression decreased in the groups with high ROS.